Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010 về thủy sản và sản phẩm thủy sản xác định thuốc bảo vệ thực vật nhóm phospho hữu cơ bằng phương pháp thế nào?

Nội dung chính

• Thuốc thử và vật liệu thử phương pháp sắc ký khí để xác định thuốc bảo vệ thực vật nhóm phospho hữu cơ có gì?
• Thiết bị, dụng cụ xác định thuốc bảo vệ thực vật nhóm phospho hữu cơ gồm những gì?
• Phương pháp sắc ký khí cần chuẩn bị mẫu và làm sạch dịch chiết ra sao?

Thuốc thử và vật liệu thử phương pháp sắc ký khí để xác định thuốc bảo vệ thực vật nhóm phospho hữu cơ có gì?

Theo Mục 3 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010 quy định thuốc thử và vật liệu thử phương pháp sắc ký khí để xác định thuốc bảo vệ thực vật nhóm phospho hữu cơ chỉ sử dụng các thuốc thử tinh khiết phân tích và sử dụng nước cất hoặc nước có độ tinh khiết tương đương, trừ khi có quy định khác như sau:

- Natri sulfat, dạng hạt, được làm khô bằng cách sấy qua đêm ở nhiệt độ 350 0C và giữ trong chai thuỷ tinh.

- Hexan, loại dùng cho GC.

- Etyl axetat, loại dùng cho HPLC.

- Khí mang heli, loại dùng cho GC.

- Bông thuỷ tinh, SUPELCO, 2-0411 hoặc loại tương đương.

- Silicagel, cỡ hạt 60 mesh (silica-60), Merck, Darmstadt, Đức hoặc loại tương đương.

- Silicagel đã hoạt hoá: Cân một lượng silicagel, rửa sạch bằng diclometan rồi cho vào trong chén sứ và để trong tủ sấy ở nhiệt độ 120 0C trong vòng 12 h. Sau đó, dùng giấy thiếc bọc kín miệng chén sứ rồi để lại vào tủ sấy ở nhiệt độ 120 0C trước khi sử dụng.

- Xelit.

- Dung dịch rửa giải: Hỗn hợp gồm dung dịch axetonitril (loại dùng cho GC) và axeton (loại dùng cho GC) theo tỷ lệ thể tích 9:1 được pha trước khi sử dụng.

- Các chất chuẩn thuốc bảo vệ thực vật OP (Promochem, Wesel, Đức hoặc loại tương đương): dimethoate, chlorfenvinphos (đồng phân E+Z), chlorpyrifos, methidathion và phosmet, độ tinh khiết lớn hơn 99 %.

- Dung dịch chuẩn thuốc bảo vệ thực vật OP trong axeton: Chuẩn bị các dung dịch chuẩn thuốc bảo vệ thực vật OP trong axeton từ các chất chuẩn. Tuỳ theo nồng độ thuốc bảo vệ thực vật có trong ống chuẩn, dùng bình định mức và lượng axeton (loại dùng cho GC) thích hợp.

CHÚ THÍCH: Các chuẩn phải được bảo quản ở nhiệt độ – 20 0C.

- Dung dịch chuẩn thu hồi: Pha các chuẩn của các OP trong axeton để có hàm lượng trong khoảng 0,005 mg/ml đến 50 mg/ml.

- Dung dịch chuẩn trung gian: Pha loãng các chuẩn ban đầu trong axeton được các dung dịch chuẩn trung gian.

- Dung dịch chuẩn làm việc: Pha loãng các chuẩn trung gian trong hexan được các chuẩn làm việc. Các chuẩn làm việc được dùng để bơm vào GC.

Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010 về thủy sản và sản phẩm thủy sản xác định thuốc bảo vệ thực vật nhóm phospho hữu cơ bằng phương pháp thế nào?

Thiết bị, dụng cụ xác định thuốc bảo vệ thực vật nhóm phospho hữu cơ gồm những gì?

Theo Mục 4 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010 quy định sử dụng các thiết bị, dụng cụ của phòng thử nghiệm thông thường và cụ thể như sau:

- Cân phân tích, có thể cân chính xác đến 0,1 mg.

- Cốc thủy tinh có mỏ.

- Máy nghiền.

- Máy trộn cao tốc.

- Máy cô quay chân không.

- Tủ sấy.

- Lò nung.

- Máy sắc ký khí, được trang bị detector ECD và NPD.

- Cột sắc ký thủy tinh, có van khoá, chiều dài 150 mm, đường kính trong 5 mm và chiều dài 50 mm, đường kính trong 20 mm.

- Cột mao quản (cho máy GC), loại HP Ultra 2, chất nhồi cột chứa 5 % metylsilicol, chiều dài 25 m, đường kính trong 0,2 mm, độ dày lớp pha tĩnh 0,33 mm hoặc tương đương.

Phương pháp sắc ký khí cần chuẩn bị mẫu và làm sạch dịch chiết ra sao?

Theo Mục 5 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010 quy định chuẩn bị mẫu thử, mẫu trắng, mẫu để xác định độ thu hồi và làm sạch dịch chiết như sau:

- Chuẩn bị mẫu thử

+ Cân 5 g mẫu đã được nghiền bằng máy nghiền, chính xác đến 0,1 mg, rồi cho vào cốc thuỷ tinh có mỏ. Thêm 1 g xelit, 30 g natri sulfat khan rồi nghiền đều.

Tiếp tục thêm vào 150 ml dung dịch rửa giải rồi trộn hỗn hợp trong 3 min trong máy trộn cao tốc để chiết lấy các thuốc bảo vệ thực vật từ mẫu. Sau đó, lọc dung dịch bằng giấy lọc.

+ Sản phẩm chiết được cô đặc trên máy cô quay đến khoảng 5 ml, sau đó cô tiếp cho đến khô trên máy cô quay trong chế độ chân không ở nhiệt độ 40 0C. Hoà cặn thu được 1 ml hexan rồi làm sạch dịch chiết theo 5.4 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010.

- Chuẩn bị mẫu trắng: Mẫu trắng được định nghĩa là mẫu thủy sản đã được xác định không có chứa thuốc bảo vệ thực vật gốc OP.

Tiến hành chuẩn bị mẫu trắng giống như chuẩn bị đối với mẫu thử theo quy định tại 5.1 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010.

- Chuẩn bị mẫu để xác định độ thu hồi: Thêm 1 ml dung dịch chuẩn thu hồi có hàm lượng từ 0,005 mg/ml đến 50 mg/ml vào 5 g mẫu trắng, trộn đều mẫu bằng máy nghiền. Tiến hành chuẩn bị mẫu giống như chuẩn bị đối với mẫu thử theo quy định tại 5.1 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010

- Làm sạch dịch chiết

+ Chuẩn bị cột: Chuẩn bị cột, gồm bông thuỷ tinh, 1,3 g silicagel đã hoạt hoá, 1 g natri sulfat khan. Trước khi tiến hành phân tích, cho vào cột 5 ml etyl axetat và sau đó là 5 ml hexan.

+ Làm sạch dịch chiết

++ Chuyển dịch thu được theo 5.1.2, 5.2 và 5.3 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010 vào các cột sắc ký đã được chuẩn bị.

++ Rửa dung dịch trong cột với 5 ml hexan, sau đó với 2 ml hỗn hợp hexan-etyl axetat theo tỷ lệ thể tích 95:5. Tiếp theo, rửa giải với 8 ml hỗn hợp hexan-etyl axetat theo tỷ lệ thể tích 50:50 rồi tách lấy phân đoạn 1. Sau đó, tiếp tục rửa giải với 5 ml etyl axetat rồi tách lấy phân đoạn 2. Tốc độ rửa giải phải luôn điều chỉnh đạt 10 giọt/min.

++ Thu các phân đoạn chiết vào các bình thuỷ tinh đáy tròn của máy cô quay chân không. Tiến hành cô trên máy cô quay cho đến khô. Sau đó, thêm chính xác 1 ml hexan vào từng bình, lắc cho tan đều rồi hút để bơm vào máy GC theo tiểu mục 5.5 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8347:2010.